Анализ крови пцр гепатит

Анализ крови пцр гепатит

Переезд склада в Европу.
Реализуем препараты от гепатита С в России по закупочной цене - ликвидация склада
Перейти на сайт

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

Содержание статьи:

Что такое анализ ПЦР?

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Виды ПЦР-анализа на гепатит С

Различают три вида ПЦР-анализа:

    Качественный анализ ПЦР . Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.

Количественный анализ ПЦР . Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.

  • Генотипирование . Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.
  • Показания к ПЦР-анализу на гепатит С

    ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

    • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
    • положительный результат иммуноферментного анализа;
    • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
    • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
    • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
    • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
    • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
    • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
    • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

    Расшифровка ПЦР-исследования на гепатит С

    Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

    Расшифровка качественного анализа .

    В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

    Вирус гепатита С (ВГС) является причиной примерно 20 % острого гепатита, 60- 70 % хронического гепатита и примерно 30 % цирроза и рака печени. ВГС, обнаруженный в 1989 году, является РНК-вирусом рода Flavivirus семейства Togaviridae, размером 40-60 нм, с преобладанием содержания липидов. Существует, по крайней мере, 6 генотипов и 50 серотипов ВГС. Знание генотипа или серотипа (специфические антитела генотипа) ВГС является полезным для рекомендаций и назначения лечения. ВГС передается при контакте с зараженной кровью или препаратами зараженной крови: переливание крови, использование игл и шприцев после другого человека, без стерилизации или плохо стерилизованных, татуировки, вакцинация нестерилизованным оборудованием, совместное использование зубной щетки, бритвенных принадлежностей, пинцетов, маникюрного набора. Присутствует и в биологических средах (слюна, молоко, влагалищные выделения, сперма и т.д.), но в меньшей концентрации, чем вирус В. Может передаваться от матери к плоду. Уровень вертикального пути передачи у беременных женщин с анти-HCV положительным оценивается в 2,7-4,4 %. Этот показатель достигает значения 5,4-8,6 % у беременных, у которых коинфекция ВГС-ВИЧ. Примерно 85 % острой формы переходит в хроническую форму. Гепатоцеллюлярный рак может возникнуть приблизительно у 20 % больных циррозом печени (в среднем, за 30 лет) и 1-5 % из них инфицированы ВГС.

    Начало заболевания коварно, вирус называют бомбой замедленного действия или ласковый убийца. Серологические окна между наличием ВГС и обнаружением анти-ВГС варьируют у различных пациентов. Текущие иммунологические тесты выявляют антитела, в среднем, через 7-8 недель от начала заболевания. В случае спонтанного выздоровления анти-ВГС могут сохраняться на протяжении всей жизни или постепенно снижаться до исчезновения в течение нескольких лет. У больных с хронической инфекцией анти-ВГС сохраняются на неопределенный срок. Среди населения с пониженным риском число лиц, выпадающих из диагностики, составляет 0,5-1 %.

    Анализ РНК HCV (определение РНК вируса гепатита С), часто называемый анализ ПЦР гепатита С это исследование крови, позволяющее выявить непосредственно генетический материал вируса гепатита (каждый вирус это одна частица РНК). Этот тест чаще всего выполняется методом ПЦР, отсюда и название ПЦР гепатита С. Существуют качественный и количественный анализы на РНК ВГС.

    Качественный анализ указывает на наличие вируса в крови. Данный тест необходимо проводить всем пациентам, у кого обнаружены антитела к гепатиту С. Его результат может быть обнаружено или не обнаружено. Референсные значения (значение, которое должно быть в норме) не обнаружено. Результат обнаружено может свидетельствовать о том, что вирус размножается и инфицирует все новые клетки печени. Качественный тест ПЦР имеет определенную чувствительность. Это означает то, если вирус присутствует в крови в очень малой концентрации (ниже порога чувствительности метода), может быть получен результат не обнаружено. Поэтому, при проведении качественного ПЦР у пациентов с низкой виремией (концентрацией вируса), например, проходящих противовирусную терапию, важно знать чувствительность диагностической системы. Для контроля вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии желательно использовать диагностическую систему с чувствительностью не ниже 50 МЕ/мл.

    Подготовка пациента: Сдача крови натощак

    Не хотите болеть? Сохраните статью

    Вконтакте

    Facebook

    Twitter

    Одноклассники

    Материал: Плазма крови.

    Здравствуйте, задавала вопрос ранее ,но ответа не получила. помогите разобраться в проблеме; В конце ноября 2010 года во время второй беременности-35 недель пришли anti-hcv положительные, врач направил на пцр -рнк вируса не обнаружена. В это время мне ставили холестаз на фоне беременности(зуд ступней и ладоней по ночам, повышенные алат, асат, щф.), кожа не желтела, кал и моча-норма. Пропив урсосан-показатели пришли в норму, зуд пропал. Сказали что после родов все пройдет. после родов все показатели норма, а т.к. рнк вируса-отрицательна то к моему вопросу никто не возвращался. Спустя 8 месяцев-анализ на anti-hcv-0,91-нереактивный. На этом я успокоилась. Спустя 2 года и 4 месяца 12 марта года появился небольшой зуд ладоней и ступней, дискомфорт высоко в подреберье справа- заключение фгдс- большой дуоденальный сосочек отечен, отсутствует пассаж желчи в 12-перстной кишке. биохимия крови-билирубин 15-3,алт-14,аст-20,общ. белок-70, мочевая к-та-293, мочевина-5,6, холест.-4,6, щф-59,ггтп-18, с-реакт. белок-2. Сахар крови-4,2, узи брюшной полости без патологий( анатомич. изгиб желчного в шеечном отделе). маркеры гепатита Б и А-отрицательно, а anti-hcv-28,51-реактивный. От 25 марта — анализ пцр-рнк вируса гепатита С не обнаружена ( в 2 разных лабораториях). Скажите что со мной и есть ли у меня гепатит С, если с момента впервые обнаруженных антител(2.5 года) рнк не обнаружена никогда? Помогите с ответом, у меня 2 маленьких детей.

    Вы здоровы, вируса в организме нет, антитела остались — это иммунная память. С уважением, гепатолог Степанвоа Т.В.

    Здравствуйте доктор, спасибо за ответ! Скажите пришел анализ на антитела к гепатиту с развернутый и что он означает: спектр положительный, в спектре антител-igG cor-полож. igGns3-отриц. igGNs4 и igGNs5-отрицательный. По ночам беспокоит боль справа, как бы гуляющая, пью хофитол, урсосан, зуд ступней и ладоней стал меньше. и может ли эта боль быть на фоне обострения холестаза и отечного БДС и отсутствия пассажа желчи? И как часто мне надо сдавать пцр на определение рнк вирусаHCV? Если за 2,4 года его ни разу не выявляли?Доктор скажите, почему в году показательanti-hcv-0,91 а в марте -28,51? Помогите а то совсем запуталась!

    Количество антител постоянно колеблется, диагностической роли оно не играет. Самое главное, что РНК вируса у Вас не обнаруживается на протяжении длительного времени. Боль обусловлена дисфункцией сфинктера Одди, Вы правильно принимаете желчегонные препараты. На РНК вируса можно не сдавать, если нет возможности заразиться ( операции. стоматолог, маникюр, педикюр). С уважением, гепатолог Степанова Т.в.

    Здравствуйте доктор, спасибо за ответ! Хотела уточнить: может ли быть рнк отрицательна на протяжении 2, 5 лет при очень минимальном количестве вируса( порог чувствительности пцр его не читает). т.е он есть в организме или его нет совсем( если рнк не обнаружена) и должны ли со временем исчезнуть антитела из организма? Мне сказала наш инфекционист на протяжении 5 лет сдавать пцр и анализ на антитела, если они исчезнут и пцр будет все время отрицательна- тогда диагноз снят. Если антитела это имунная память то через какое время они пропадут и почему их диапазон колеблется?

    Никто не знает, пропадут антитела со временем или нет. У меня наблюдается очень много людей, у которых есть антитела к вирусу гепатита С, а РНК стойко отрицательно на протяжении более 10 лет, при этом здоровый образ жизни они вовсе не ведут. Это говорит о том, что вируса в организме нет. С уважением, гепатолог Степанова Т,В.

    Доктор милая помогите! Сдала Hbs Ag-нереактивный. инфекционист сказала сделать прививку от гепатитаВ и сдать HBeAg и anti-HBcor(IgM и IgG). Вчера сдала:HBeAg-0.047-нереактивный, anti-HBcor(total)-результат 10,0-реактивный. Доктор все анализы биохимии приведены выше. Скажите. неужели кроме антител гепатита С я больна гепатитом В? Что мне делать дальше?

    Нет, Вы здоровы, но что бы понять целесообразность вакцинации от гепатита В, нужно сдать анализ крови на количество антител к HBsAG вируса гепатита В. С уважением, гепатолог Степанова Т.В.

    Об авторе сайта

    Степанова Татьяна Владимировна врач — гепатолог, гастроэнтеролог, пульмонолог, терапевт высшей квалификационной категории, действующий член EASL (Европейской ассоциации по изучению печени), имеет международный сертификат исследователя стандарта GCP (Good clinical practice), подполковник медицинской службы.

    1996 году окончила Военно-медицинский факультет при Саратовском государственном медицинском университете. Была направлена в Южно-Сахалинск на должность старшего ординатора Гарнизонного госпиталя, где в течение 7 лет занималась лечением больных с тяжелой терапевтической патологией: воспаление легких, бронхиальная астма, инфаркт миокарда, гипертоническая болезнь, язвенная болезнь, гепатиты и циррозы печени.

    В 2001 году прошла профессиональную переподготовку по пульмонологии, в 2003 году – по гастроэнтерологии, гепатологии.

    С 2003 по 2006 год проходила учебу в клинической ординатуре при Государственном Институте Усовершенствования врачей МО РФ.

    С 2003 года основной сферой практической деятельности является гастроэнтерология, гепатология.

    С 2003 года принимает участие в проведении клинических испытаний новых лекарственных препаратов для лечения пациентов с вирусными гепатотропными инфекциями по международным правилам GCP. Всего провела 15 клинических исследований. В настоящее время возглавляет клиническое исследование по оценке безопасности и эффективности нового препарата для лечения вирусного гепатита В. В 2009 году комиссия FDA высоко оценила работу исследовательского центра, где основным исследователем является Степанова Татьяна Владимировна.

    С 2003 года занимается лечением больных вирусными гепатитами, накопила огромный опыт лечения больных противовирусными препаратами. В совершенстве знает проблему лечения больных вирусными гепатитами с сопутствующими заболеваниями: сахарный диабет, гипертоническая болезнь, заболевания почек, бронхиальная астма, псориаз, артриты, ВИЧ, наркомания, алкоголизм. Проводит противовирусное лечение больным с компенсированным и декомпенсированным циррозом печени. Занимается лечением беременных с патологией печени.

    Благодаря глубокому знанию терапии и умелому сочетанию лекарственных препаратов выработала свои схемы лечения больных, которые позволили добиться выздоровления практически 90% обратившихся больных с вирусными гепатитами. В своей лечебной деятельности использует принципы доказательной медицины. Умело контролирует побочные эффекты противовирусных препаратов: снижение тромбоцитов, лейкоцитов, депрессивные и другие состояния, благодаря чему практически никто преждевременно не прекращает противовирусное лечение.

    В совершенстве владеет методикой проведения пункционной биопсии печени. Провела более 300 биопсий.

    С 2004 года постоянно работает в качестве консультанта на ведущих гепатологических сайтах. Ответила более чем на 20 000 вопросов, посвященных заболеванием печени. Часто оказывает профессиональную помощь в лечении гепатологических больных коллегам из различных регионов нашей страны, ближнего и дальнего зарубежья.

    Татьяну Владимировну часто приглашают на популярные медицинские телевизионные передачи в качестве врача – эксперта.

    Ответственность, компетентность, высокий профессионализм характеризуют ее во врачебной деятельности.

    О личных качествах можно судить по одному характерному факту: ее пациенты никогда не уходят к другому доктору.

    Статья о враче Степановой Татьяне Владимировне размещена в энциклопедии “Лучшие люди России” разделе “Медицина и здравоохранение”.

    Анализ ПЦР на гепатит С представляет собой внутривенный забор крови с целью определения в ней вируса РНК гепатита на генетическом уровне. Своё название анализ получил исходя из метода исследования.

    ПЦР — это полимеразная цепная реакция, с помощью которой в сыворотке крови определяют наличие гепатита С. Итог может быть положительным и отрицательным.

    Достоинства метода ПЦР

    Этот метод диагностики обладает следующими достоинствами:

    1. Метод ПЦР позволяет определить следующие результаты:
      • наличие вируса РНК;
      • степень радиоактивного излучения;
      • первоначальную генетическую информацию;
      • уникальность и неповторимость генетических данных.
    2. Можно использовать любой необходимый клинический материал:
      • кровь;
      • плазма;
      • моча;
      • биологические жидкости и выделения;
      • мокрота и другие.
    3. Позволяет определить в крови более одного микроорганизма одномоментно, в отличие от других проб.
    4. Получение результата в течение суток.
    5. Упрощённые методы хранения и транспортировки анализа, возбудители определяются даже в мёртвой среде.
    6. Уникальность ПЦР позволяет выявлять определённые микроорганизмы, которые не поддаются ни одной другой пробе.
    7. Высокая степень чувствительности реактивов, тест является самым точным в своём роде.

    Особенности качественного анализа ПЦР

    Качественный тест проводится с целью определения наличия вируса в крови и получения отрицательного или положительного итога.

    Показанием к проведению этого вида диагностики является выявление в организме пациента антител к гепатиту С.

    Возможные итоги:

    • обнаружено (положительный);
    • не обнаружено (отрицательный).

    Качественный тест не подходит пациентам с очень низким содержанием вируса в крови, так имеет определённую чувствительность.

    Обнаружить вирус гепатита С можно уже через несколько недель после инфицирования организма, даже при отсутствии антител к этому возбудителю. Такой результат свидетельствует о наличии в организме и кровипациента фрагмента РНК, характерного для гепатита С.

    Пациент считается инфицированным данным вирусом и подвергается дальнейшему распространению патогенных клеток в организме.

    Результат «не обнаружено»

    Такой вариант говорит о том, что в исследуемом образце биологического материала отсутствуют фрагментыРНК специфичные для гепатита С. Это отрицательный результат.

    Чувствительность теста не позволяет выявить низкое содержание фрагментов РНК, поэтому итог «не обнаружено» не всегда является правдоподобным.

    Особенности интерпретации результатов

    Главной особенностью интерпретации результатов является порог чувствительности метода ПЦР.

    Он зависит от следующих показателей:

    • точность проведения исследования;
    • вид и качество используемой аппаратуры.

    Отмечено, что чувствительность может колебаться в пределах 10-500 МЕ/мл. Из этого следует, что если в организме исследуемого пациента присутствует вирус в концентрации меньше 10 МЕ/мл тест покажетрезультат «не обнаружено». Но это вовсе не означает, что возбудитель полностью отсутствует.

    Варианты диагностических систем

    На данный момент выделяют следующие варианты систем диагностики:

    1. Если забор крови проводится у пациента, находящегося на противовирусном лечении, то должны быть использованы системы диагностики чувствительностью не меньше 50 МЕ/мл. Для этой цели применяют следующие анализаторы:
      • Cobas Ampicolor ВГС-Теst;
      • РеалБест РНК ВГС.
    2. Чтобы поставить окончательный диагноз «гепатит С» необходимо обнаружить РНК вирус в трёх разных заборах биологического материала. Эти рекомендации разработаны Всемирной Организацией Здравоохранения. Эсли итог трехкратно отрицательный, то диагноз не подтверждается.
    3. На данный момент помимо метода ПЦР существует более точный тест, именуемый ТМА (транскрипционный метод амплификации). Его порог чувствительности гораздо выше, чем в других методикахдиагностики.

    Диапазон выявляемых модификаций вирусов

    На данном этапе развитии генетики известно несколько видов и вариантов модификации вирусов.

    Лабораторная диагностика в нашей стране со стопроцентной точностью может определить следующие генотипы:

    Особенности количественного анализа ПЦР

    Количественный анализ представляет собой определение вируса гепатита С в организме человека. Во время исследования с помощью ПЦР определяют РНК и вирусную нагрузку в исходном материале. Иначе, можно сказать, что тест позволяет выявить какое количество вирусных клеток находится в биологической жидкости. Для этого вида исследования используется только венозная кровь. Специфической подготовки к тесту нет.

    Количественный анализ позволяет вести контроль на уже начавшемся этапе лечения и оценивать его эффективность. Для оценки берут данные теста до начала и во время терапевтических мероприятий. С помощью полученных результатов можно прогнозировать течение болезни.

    При успешности выбранного метода лечения через 3 месяца количество РНК должно уменьшиться в несколько раз. Согласно рекомендациям количественный анализ проводят через один, затем через три и шесть месяцев. Последний результат при успешности лечения должен быть отрицательным.

    Оценка результатов количественного теста ПЦР

    В нашей стране существует 2 возможных варианта оценки результата количественного теста ПЦР:

    • количество копий на миллилитр биологической жидкости;
    • количество международных единиц на миллилитр.

    Чтобы получить международные единицы количество копий делят на 4.

    Выделяют 2 уровня нагрузки или виремии:

    • высокая с показателем ПЦР выше 800000 МЕ/мл;
    • низкая с показателем ПЦР ниже 400000 МЕ/мл.

    Результат количественного теста предусматривает 2 варианта:

    • «ниже диапазона измерений»;
    • «не обнаружено» (отрицательный).

    Оценка: «ниже диапазона измерений»

    Такое заключение ставится когда количественный тест РНК не обнаружил в исходном материале клетки возбудителя гепатита С. Но вирус всё равно присутствует в крови. Достоверность анализа подтверждаетсякачественным способом, так как порог чувствительности количественного теста может не обнаружить маленькие значения и концентрации возбудителя.

    Оценка: «не обнаружено»

    Такое заключение ставиться когда в исходном материале во время диагностики не были обнаружены РНКвирусы гепатита С. Это отрицательный результат.

    Интерпретация результатов анализа количественного теста ПЦР

    С помощью показателя вирусной нагрузки определяют:

    • степень запущенности болезни;
    • насколько заразен больной;
    • эффективность противовирусной терапии.

    Чем выше показатели вируса гепатита С в организме, тем опаснее пациент для окружающих людей и тем прогрессивнее его заболевание.

    ПЦР на гепатит С является важным методом диагностики, особенно в процессе терапевтических мероприятий. Благодаря полученным отрицательным или положительным итогам можно оценить их эффективность, полностью излечить больного или сократить сроки лечения.

    Автор: Петрунина Светлана Сергеевна,
    медсестра палаты интенсивной терапии,
    специализация-острые отравления, реанимация,
    специально для сайта moizhivot.ru

    Полезное видео о полимеразной цепной реакции

    Гастроэнтерологи в вашем городе

    Выберите город:

    Качественный анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР на гепатит С определяет наличие или отсутствие ВГС в организме. В лабораторных условиях исследуется структура РНК, в составе которой и будет находиться вирус. В случае выявления вируса С необходимо пройти курс лечения, так как запущенное состояние печени в результате приведет к тяжелым последствиям. Качественный ПЦР проводится и после выздоровления для подтверждения отсутствия антител. Назначается и для профилактического осмотра. При низкой концентрации возбудителя в крови ПЦР (качественный) может ничего не обнаружить, ведь у диагностической системы есть свои пороги чувствительности. В случае начальной стадии болезни или легкой форме проводят ПЦР ультра диагностику на сверхчувствительном оборудовании.

    Что такое РНК вирус?

    Термином РНК вируса гепатита С (или вирус гепатита С РНК) называется само заболевание печени. Вирус С связывается со здоровой клеткой организма, проникая внутрь. Со временем разносится по всему организму, стоит только ему попасть в кровь. В итоге возбудитель проникает в печень, сращивается с ее клетками и усиленно работает. Печеночные клетки (гепатоциты) работают под его воздействием, претерпевая изменения, и от этого гибнут. Чем дольше вирус С находится в печени, тем большее количество клеток гибнет. Со временем развиваются опасные болезни, приводящие к злокачественному перерождению и летальному исходу.

    Заражение печени этой разновидностью вируса может никак не проявляться внешне. Долгие годы или десятки лет зараженный человек чувствует себя абсолютно здоровым, и только случайное обследование чаще всего и выявляет патологию. При сдаче крови на гепатит исследуется часть цепочки РНК (рибонуклеиновой кислоты), входящей в состав человеческого гена (ДНК). Результаты лабораторного исследования не стоит использовать для самолечения, ведь это только показатель. Точную картину и дальнейшую диагностику лучше определит врач.

    Когда делается: показания к исследованию

    В подтверждение ВГС назначается анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция). Исследования ПЦР помогают найти материал возбудителя в структуре РНК и назначить эффективную терапию. Назначается в следующих случаях:

    • выявление признаков воспаления печени;
    • скрининговые исследования с целью профилактики;
    • обследование контактирующих людей;
    • диагностирование гепатитов смешанного происхождения (определение главного возбудителя);
    • определение уровня активности размножения вируса при хронической форме;
    • цирроз печени;
    • для определения эффективности назначенного лечения.

    Исследования ПЦР назначает врач для определения эффективности курса лечения гепатита.

    Существует качественный, а также количественный анализ ПЦР. Количественный ПЦР показывает процентное соотношение РНК с носителями вируса в крови, а качественный указывает на вирусное присутствие либо отсутствие. Положительный показатель качества (присутствия РНК гепатита С) нуждается и в количественном исследовании. Высокий уровень концентрации возбудителя гепатита С сопряжена с риском его передачи, то есть заражения окружающих. Низкие показатели количества лучше поддаются лечению. Количество РНК-вирусов в составе крови никак не связано с интенсивностью заболевания. Делается анализ ПЦР и в случае интерфероновой терапии, чтобы назначить продолжительность и сложность лечебного курса.

    Особенности качественного ПЦР анализ на гепатит С

    Назначается качественный анализ с показателем полимеразной цепной реакции всем пациентам, у кого в крови обнаружены антитела к гепатиту С. Кто переболел и выздоровел, должен повторно пройти тестирование. Рекомендуется сдать анализ и на гепатит В, затем, в случае положительного заключения, и на гепатит D. Также качественно анализированная реакация должна проводиться в комплексе с другими анализами крови. Анализы покажут полную картину вирусного распространения.

    Из результатов теста будет виден только положительный анализ на гепатит С или же отрицательный, то есть наличие или отсутствия вируса. Если в выводе стоит «обнаружено», значит, вирус есть и продолжает активно действовать. Обозначение «не обнаружено» говорит об отсутствии вируса или его маленьком количестве. При таком показателе следует учитывать то, что аналитическая чувствительность диагностических систем разная и РНК гепатит С все же может находиться в крови, но не проявиться в анализе.

    Особо чувствительный метод ПЦР ультра гепатит С выявляет даже в мизерных количествах. Используется гибридизационно-флуоресцентное исследование, которое во много раз выше, чем стандартные системы ПЦР. Метод применяют в нескольких случаях:

    • подозреваются скрытые формы гепатита С;
    • диагностика ПЦР не подтвердила возбудитель, но антитела есть;
    • в случае выздоровления;
    • для выявления ранней стадии заражения.

    Расшифровка анализа

    Определение РНК вируса гепатита С методом полимеразно-цепной реакции.

    На окончательное решение при постановке диагноза влияет ПЦР расшифровка ВГС, в частности, при ультраметоде. Основной недостаток такого исследования — строгое соблюдение стерильных условий для образца и материалов. Небольшое отклонение иногда показывает неточные выводы аналитики, усложнит постановку диагноза и последующее лечение. Анализ ПЦР на определение РНК вируса гепатита не всегда уверенно показывает картину заболевания, иногда допускаются неточности, причем в обе стороны.

    Диагностируя вирус гепатита, рекомендуется применять комплексное обследование.

    Норма показателей

    Отсутствие в результатах исследования антител JgM к РНК вирусному гепатиту С считается нормой при анализе полимеразной цепной реакции. В то же время выводы серологического анализа указывают на присутствие антител к вирусу С и это также в пределах нормы. Качественное определение не показывает интенсивность заболевания, оно только выявляет возбудитель гепатита С в РНК. Такой анализ повторяют и после лечения, чтобы подтвердить действительное выздоровление.

    Отклонения

    Если антитела JgM к РНК ВГС присутствуют, это говорит о развивающемся заражении. Заболевание при этом протекает остро или хронически, проявляется в разных стадиях. Если зафиксировано уменьшение количества антител, то анализ будет свидетельствовать о достижении результатов лечения в ходе выздоровления. Встречаются в диагностике исключительно редкие случаи ложноположительных выводов. Они обнаруживаются у женщин при беременности и у людей с другими инфекционными болезнями.

    Заразиться гепатитом С может каждый. Многие люди живут с этой болезнью долгие годы и даже не догадываются, что у них внутри запущен механизм, который рано или поздно приведет к печальным последствиям. Такие лица активно заражают окружающих, и темпы заболеваемости непрерывно растут. Чтобы снизить эти показатели, каждый должен взять за правило периодически проходить анализ на гепатит С, особенно если он входит в группу риска.

    Краткая информация о болезни

    Вирус гепатита С (HCV) содержит РНК молекулу, несущую генетическую информацию и специальные белки, взаимодействующие с человеческим организмом. Передается преимущественно половым путем и через кровь. В некоторых случаях возможен вертикальный путь передачи (т. е. от матери к ребенку).

    Проникая в организм, он оседает в различных клетках крови (нейтрофилах, моноцитах, лимфоцитах) и печени (гепатоцитах).

    Коварство инфекции заключается в отсутствии симптомов острой фазы. Она сразу переходит в хроническую бессимптомную и медленно осуществляет свое разрушительное действие.

    Последствия

    От начала проникновения в организм РНК вируса гепатита С до появления первых симптомов могут пройти долгие годы, порой 15-20 лет и более. Возникновение жалоб характерно для запущенной формы гепатита С, когда печень уже значительно поражена. У большинства таких пациентов диагностируют следующие печеночные патологии:

    • цирроз;
    • некроз;
    • доброкачественные кисты;
    • онкологию.

    До развития осложнений больной может отмечать легкое недомогание, которому обычно не придает значения.

    Кому проводят анализ

    Анализ на РНК вируса гепатита С показан людям, которые более подвержены заражению. В такую группу входят:

    • наркоманы;
    • люди, ведущие беспорядочную половую жизнь;
    • все, кто практикует незащищенные половые акты, особенно с новым партнером;
    • поклонники тату, пирсинга, салонов красоты (парикмахерских);
    • лица, которые подверглись хирургическим вмешательствам (включая роды, стоматологические патологии);
    • матери детей, рожденных до 1990 года (дело в том, что в то время болезнь еще не была выявлена, поэтому при переливании крови таких женщин заражали инфекцией);
    • дети больных матерей;
    • родственники и половые партнеры инфицированного;
    • пациенты с хроническими заболеваниями печени невыясненной природы.

    Список довольно обширный, поэтому мало кто может с уверенностью сказать, что его риск заражения равен нулю.

    Домашнее тестирование

    Многие хотели бы пройти анализ на определение РНК вируса гепатита С, но не обращаются к врачу из-за стеснения, отсутствия времени, неприязни к больницам и т. п.

    Решить проблему поможет несложная диагностика при помощи специального экспресс-теста (ИФА). В данном случае используется качественный метод, определяющий только факт наличия антител к вирусу.

    Действует по принципу теста для определения беременности, но в качестве исследуемого материала потребуется кровь:

    1. В комплекте с пластиковой полоской (монитором для оценки результата) идет специальный ланцет, прокалывающий палец одним нажатием на кнопку.
    2. При помощи входящей в состав пипетки кровь помещается в специальный отсек, а через 10-15 минут можно оценить ответ.
    3. Две полоски говорят о положительном результате, одна — об отрицательном. Появление второго бледного пятна в тестовой зоне указывает на присутствие болезни, однако концентрация антител в крови слишком мала.

    Если болезнь была выявлена, необходимо отправиться к врачу для дальнейшего обследования.

    Основные принципы выявления РНК вируса гепатита С

    С такими результатами необходимо обратиться к инфекционисту и гепатологу, которые назначат дополнительные исследования.

    Главное в проведении последующих анализов – выявить, к какому генотипу относят обнаруженный гепатит, и определить его количество в крови. От полученных данных будет зависеть дальнейшее лечение, так как все разновидности отличаются друг от друга и могут по-разному реагировать на препараты. Кроме того, микроорганизмы умеют умело маскироваться.

    Виды исследований

    При диагностике HCV применяют один из следующих методов:

    1. ПЦР. В данном случае речь идет о генетическом материале возбудителя.
    2. Количественный анализ на РНК вируса гепатита С (r-DNK, TMA). Такой анализ проводят после подтверждения наличия возбудителя в организме. Его еще называют вирусной нагрузкой. Он позволяет выявить количество болезнетворных представителей в 1 мл крови. От этих показателей зависит длительность лечения и степень заразности больного. R-DNK производит тестирование в диапазоне свыше 500 ME, а TMA в 5-10 ME. Оба метода относят к простым и дешевым.
    3. Генотипирование. Выполняется в последнюю очередь и позволяет уточнить, к какой разновидности относят выявленную болезнь.

    Оценка результатов

    Если анализ РНК вируса гепатита С дал положительный результат методами ПЦР и ИФА, диагноз подтверждают. Однако отрицательный результат еще не дает гарантии отсутствия инфицирования. К сожалению, такое случается часто, потому что в процессе могут применяться реагенты с различной чувствительностью.

    Многих интересует, что значит «РНК вируса гепатита С не обнаружено». Такой показатель действительно может указывать на отсутствие болезни или на его небольшую концентрацию. К примеру, ПЦР 200 ME/ML даст ложный результат, если у больного количество вирусных копий незначительно. Такое может случаться при недавнем заражении или при прохождении лечения.

    Зачастую пациенту не нужно владеть подобной информацией, так как эти моменты должен учитывать лечащий врач.

    Выявление РНК вируса гепатита С при количественном исследовании от 400 000 ME и более говорит, что вирус не только присутствует в крови, но и активно размножается, инфицируя при этом окружающих. Если показатель приближен к 800 000, это свидетельствует об острой фазе и активном поражении клеток печени.

    Хотя здесь мнения специалистов расходятся. Некоторые из них утверждают, что взаимосвязи со скоростью прогрессирования болезни и количеством копий вируса нет.

    Такие больные должны быть особо осторожны в общении со своими близкими.

    Дополнительное обследование

    После определения РНК вируса гепатита С пациенту могут быть назначены и другие исследования, включающие:

    • выявление гепатита B;
    • общий анализ крови и мочи;
    • биохимию;
    • УЗИ органов брюшной полости;
    • МРТ или КТ печени (по показаниям).

    После получения всей необходимой информации врач тщательно изучает результаты, состояние здоровья больного, после чего подбирает для него индивидуальную лечебную схему.

    При своевременном обнаружении поражение печени, как правило, отсутствует.

    Терапевтические методы и сроки

    Длительность лечения зависит от генотипа. На сегодняшний день известно 11 разновидностей из них 6 встречаются наиболее часто. В России наиболее распространены 1, 2, 3-й тип.

    Еще несколько лет назад гепатит C входил в группу неизлечимых заболеваний. Терапия, проводимая преимущественно интерферонами, могла значительно улучшить состояние больного, но не излечить его полностью.

    Прорывом в лечении заболевания стал препарат «Софосбувир», который появился в аптеках под другим торговым названием «Совальди». На сегодняшний день имеется несколько аналогов эффективного средства:

    Зачастую они хорошо переносятся больными, но в ряде случаев наблюдаются:

    • головная боль;
    • тошнота;
    • бессонница;
    • ухудшение аппетита;
    • судороги;
    • мигрени;
    • депрессии;
    • ощущение сухости во рту;
    • боль в груди;
    • выпадение волос.

    Единственный недостаток такого лечения – крайне высокая стоимость (в среднем 10 000-12000 р. за упаковку), которая в зависимости от выбранного медикамента может варьироваться в большую или меньшую сторону.

    Повторное исследование

    После окончания лечения, длящегося от 12 до 24 недель, пациенту будет назначен повторный анализ на наличие вирусной РНК в крови.

    В этом случае необходимо будет применять метод с минимальным порогом чувствительности, так как после воздействия препаратов концентрация HCV может быть незначительной. В таком случае лечение необходимо будет продолжить.

    Отрицательным результатом считается отсутствие вируса гепатита С, когда РНК возбудителя не обнаружено. Такое исследование необходимо будет провести еще несколько раз (с небольшими интервалами), чтобы удостовериться, что лечение оказалось успешным.

    Профилактика

    Всем, кто прошел длительное и дорогое лечение от гепатита С, стоит помнить, что к нему организм не вырабатывает иммунитет, поэтому повторное заражение возможно.

    Эту болезнь легче предотвратить, чем вылечить. Полностью оградить себя от возможной опасности не получится, но для того чтобы потом не спрашивать, что значит «РНК вируса гепатита С обнаружено», необходимо соблюдать следующие меры предосторожности:

    • не пользоваться чужими предметами личной гигиены (бритвами, ножницами, зубными нитями);
    • избегать незащищенных половых связей;
    • посещать стоматологии, салоны (красоты, тату и т. д.) только с хорошей репутацией;
    • закрывать пластырем или бинтом все повреждения кожных покровов;
    • по возможности избегать контакта с инфицированным.

    Чем раньше была выявлена болезнь, тем эффективнее будет лечение. Обычно при отсутствии поражения внутренних органов гепатит С излечивается полностью и без последствий.

    Если не лечить гепатит С, он рано или поздно приведет к циррозу или раку печени. Это может случиться даже через 30-40 лет после заражения вирусом.

    Цирроз, появившийся под воздействием гепатита С, является хроническим неизлечимым заболеванием. На ранних стадиях можно замедлить его течение, в запущенном случае спасти человека может только трансплантация печени.

    Узнав о положительном результате на гепатит С, не нужно сразу впадать в панику. Сначала необходимо проверить состояние своей печени и приступать к борьбе с инфекцией и сопутствующими патологиями. Лечение длительное и дорогое, но дает пациенту шанс на долгую и здоровую жизнь.

    Анализ ПЦР гепатит С – это исследование, основной целью которого является идентификация генетического материала возбудителя. Анализ выявляет возбудитель заболевания методом использования полимеразной цепной реакции. Данная диагностика отличается высокой степенью точности, специфичностью к выявлению отсутствия или наличия вирусной инфекции.

    Суть диагностики

    Чтобы провести ПЦР анализ на определение вируса гепатита С у пациента берётся венозная кровь, которая потенциально содержит в себе РНК (рибонуклеиновая кислота) HCV искомого вируса.

    Тест ПЦР на гепатит С подразумевает порядок действий, когда в частицы крови пациента добавляют:

    • праймеры (короткие искусственно-синтезируемые участки необходимо гена);
    • специальный фермент (РНК-полимераза).

    После забора биологический материал отправляется на исследования в лабораторию. Одна порция крови нужна для проведения непосредственно ПЦР анализа, вторая – отправляется на исследование по методу ИФА. Фермент способен за короткое время увеличить численность генетического материала вируса возбудителя. В специальном аппарате проводится несколько циклов тепловых и охлаждающих процессов. На конечном этапе полученный материал сопоставляется с генами вируса и делается заключение о наличии или отсутствии патологии в организме пациента.

    Суть и проведение ПЦР анализа в лаборатории. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

    Виды исследования

    Существует 3 вида диагностики, дающие возможность определять наличия вируса гепатита С в организме человека:

    • генотипирование;
    • качественный;
    • количественный.

    Качественный метод

    Диагностика гепатита С качественным методом применима для пациентов, у которых в анализе крови определены антитела к вирусу. В случае наличия острой фазы РНК ВГС подобные диагностические мероприятия позволяют определить наличие заболевания за 1-2 недели после инфицирования. В этот период антитела к гепатиту С могут быть ещё не выработаны.

    Количественный метод

    Количественный метод диагностики используется для определения концентрации вируса в образцах крови. Подобный тест на виремию (степень концентрации) даёт возможность точно определить количество единиц вирусной РНК. Конечный результат выражается в соответственном объёме. Если речь идёт о количественном анализе, тогда показатели измеряются в 1 мл (1 куб. см).

    Параметр вирусной нагрузки означает уровень инфекционности заболевания, то есть отображает степень «заразности» пациента. На практике это значит, что чем выше концентрация вируса в крови, тем больше шансов у пациента заразить окружающих гепатитом С. Количественный метод исследования также позволяет установить качество и результативность проведённого лечения.

    Генотипирование

    Генотипированием выявляют мутации возбудителя заболевания. Перед назначением лечебного плана определяют генотип вируса: от этого зависит качество и продолжительность терапии. Так, например, при лечении заболевания I-типа эффективность составляет 60%, в случае II, III-типа – около 80%.

    Достоинства анализа ПЦР на гепатит

    Среди основных достоинств проведения процедуры выделяют:

    1. Возможность ранней диагностики. ПЦР анализ способен определить наличие вируса на ранних стадиях заражения.
    2. Низкая погрешность результатов. Исследуемый биологический ресурс позволяет диагностировать участок генетического материала, который является характерным только для одного типа вирусной инфекции. Это обстоятельство позволяет не допустить ложных результатов диагностики.
    3. Высокая степень чувствительности. Анализ ПЦР способен выявлять РНК вируса в небольших количествах, что также дает возможность вовремя отследить скрытые инфекции.

    Показания к проведению

    Сдавать анализ ПЦР на гепатит C нужно, если есть:

    • наличие контактов с больными людьми, которое могло бы привести к заражению;
    • симптомы заболевания цирроза печени (увеличение селезенки, нехарактерные изменения размеров печени, обнаружение на животе венозного сплетения под кожей);
    • положительные результаты ИФА;
    • увеличение активности АСТ и АЛТ (проявляется в биохимическом анализе крови);
    • необходимость контроля ведения антивирусной терапии;
    • проведение начального этапа лечения для необходимости установления вирусной нагрузки;
    • проведение завершающего этапа терапии для исключения возможных рецидивов;
    • наличие у пациента гепатита В, чтобы исключить вариант развития смешанного поражения печени.

    Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

    Подготовка к ПЦР анализу включает следующие рекомендации:

    • забор крови проводится утром;
    • анализ проводится натощак, поэтому желательно выдержать перерыв между последним приёмом пищи 8-10 часов;
    • за несколько дней до проведения диагностики следует исключить жирную, острую и жареную пищу, алкогольные напитки и курение;
    • за сутки до анализа следует воздержаться от тяжёлых физических нагрузок, исключить занятия в спортзале или бассейне.

    Результаты анализа: нормы и отклонения

    Сам анализ делается недолго, а расшифровывает результаты ПЦР на гепатит С высококвалифицированный специалист гепатолог или инфекционист. На основании результатов анализа пациенту выставляется диагноз.

    Чтобы правильно расшифровать результаты обследования, учитывают показатели:

    • биохимического анализа крови;
    • данные ультразвукового исследования;
    • результаты биопсии.

    Расшифровка количественного анализа

    При получении результатов количественного анализа ПЦР учитываются следующие показатели:

    Не все знают, для чего используют метод диагностики ПЦР на гепатит С. Одной из широко распространенных групп заболеваний являются инфекционные болезни органов желудочно-кишечного тракта. Чаще всего страдают желудок (язвы), кишечник (колиты, энтериты) и печень (гепатиты).

    На печень среди всех вышеперечисленных органов возлагается наибольшая нагрузка. В организме роль печени крайне важна:

    1. Практически все реакции метаболизма протекают в печени (именно здесь образуются все виды жизненно необходимых компонентов, позволяющих организму полноценно функционировать).
    2. Печень является главным органом, осуществляющим детоксикационную функцию. С ее помощью (в частности, через желчь) производится удаление многих субстратов, способных вызвать интоксикацию и привести к тяжелым последствиям.

    К сожалению, многие люди не следят за своим здоровьем, из-за чего начинает страдать печень. Обычно развиваются гепатиты различной этиологии (вирусные, токсические).

    Определение гепатита

    Вирусные гепатиты занимают важное место среди заболеваний печени. Тяжесть протекания заболевания, сложность лечения выносят их на первое место среди патологии другой природы этого органа.

    Все гепатиты подразделяются на острые и хронические. К острым относят гепатит А и В. Среди хронических на первом месте гепатит С.

    Данное заболевание вызывается вирусом гепатита С. Характерной чертой является то, что заболевание долгое время может протекать без каких-либо клинических проявлений.

    Передается оно преимущественно через кровь. С током крови вирус заносится в печень, где начинает размножаться в ее клетках. В результате накопления вирионов происходит разрушение зараженного гепатоцита. В ответ на это начинают вырабатываться антитела, которые начинают атаковать остатки гепатоцитов. Из-за этого со временем нарабатывается пул против клеток печени, что усугубляет течение заболевания.

    Из-за того, что болезнь протекает малосимптомно или бессимптомно, а клинические признаки появляются только при значительном поражении клеток, эта болезнь требует создания методов диагностики, позволяющих выявить ее наличие и принять соответствующие меры.

    Диагностика гепатита С: качественный и количественный анализы

    В настоящее время для диагностики гепатита С используются такие методы, как биопсия печени, иммунограмма.

    Они позволяют непосредственно определить наличие пораженных гепатоцитов (исследование биоптата печени) или специфических антител против пораженных клеток (иммунограмма). Однако существует метод, который позволяет достоверно определить наличие самого вируса. Это ПЦР — полимеразная цепная реакция.

    Суть этого метода заключается в том, что в определенных условиях происходит наработка цепей РНК. Это происходит из-за того, что в крови или исследуемом биоптате имеются фрагменты вирусной частицы. При соединении их с некоторыми молекулами в среде происходит синтез цепей, комплементарных вирусной РНК. При их последующем анализе и сопоставлении с известной нуклеотидной последовательностью вируса гепатита С удается выявить, имеется ли в организме данный вирус и присутствует ли поражение печени.

    ПЦР проводится после выявления в крови специфических антител против вируса гепатита. После проведения теста выносится результат — РНК “обнаружено” или “не обнаружено”. Изредка он может гласить “недостаточно материала” — в таком случае необходим повторный анализ на гепатит С.

    Если количество вирусных частиц меньше необходимого минимального количества, то можно говорить о том, что гепатита нет, а минимальные количества генетического материала могли быть “спутаны” из-за мимикрии генетического материала или некоторых последовательностей нуклеотидов, которые случайно смогли совпасть с таковой у вируса.

    1. При ПЦР отрицательный результат может наблюдаться, когда в самом деле имеются вирусные частицы в крови, однако их настолько мало (заражение произошло недавно или проведению анализа предшествовала длительная и интенсивная противовирусная терапия), что тест-система просто не смогла нормально определить их концентрацию. РНК — «не обнаружено».
    2. Если ПЦР имеет положительный результат, то вирусных частиц в крови наблюдается настолько много, что их количество превышает нижний порог чувствительности тест-системы. В этом случае высок риск развития инфекционного процесса (или он уже присутствует в довольно запущенной стадии). Обычно высокое количество вируса уже является показанием к лечению и последующей пересадке печени.

    Иногда тест может становиться ложноположительным или ложноотрицательным.

    Ложноотрицательный результат ПЦР гепатита наблюдается в том случае, когда в среде для проведения реакции присутствуют некоторые компоненты, которые ингибируют образование копий вирусной частицы. Из-за этого не удается получить истинной картины состояния крови, что способствует пропуску вируса и прогрессированию заболевания. На реакцию может повлиять и присутствие в крови гепарина (за счет снижения относительной вязкости крови). Неправильная интерпретация анализа возможна и тогда, когда не были соблюдены условия транспортировки и хранения исследуемого материала.

    Ложноположительные результаты, когда диагностируется гепатит С, ПЦР чаще всего дает при загрязнении пробирки или рабочей среды. Кроме того, положительные результаты могут наблюдаться при наличии и вирусов гепатита других групп (за счет перекрестного реагирования).

    Качественный анализ ПЦР на выявление гепатита С

    Наличие в крови большого количества криоглобулинов тоже непосредственно влияет на проведение ПЦР. Из-за этого перед проведением анализа на гепатит С обязательно нужно определить в крови их концентрацию, чтобы выявить искажение результата заранее и предотвратить его.

    После проведения указанных тестов становится понятно, имеются ли в крови вирусные частицы. При их определении рекомендовано немедленно начинать противовирусную терапию с целью замедления прогрессирования процесса. В отличие от гепатита В, полного излечения от гепатита С не наблюдается; болезнь лишь переходит в латентную стадию и начинает протекать медленнее. Поражение печени при этом неизбежно. На последней стадии процесса, когда печень уже не справляется со своей функцией, может потребоваться ее трансплантация.

    Лечение проводится преимущественно двумя препаратами — интерфероном и рибавирином.

    Доказана их эффективность в замедлении процесса поражения гепатоцитов. Попутно обязательно назначается инфузионная терапия с целью облегчения работы печени.

    Все пациенты, у которых наблюдалось увеличение количества вирусных частиц в крови, обязательно находятся на учете у гепатолога. Несколько раз в год им рекомендуется проходить профилактический осмотр с целью определения прогрессирования процесса и своевременного выявления показаний к трансплантации. Кроме того, можно использовать и гепатопротекторы, хотя мнения врачей несколько расходятся. Одни считают, что данные препараты позволяют приостановить процесс и защитить еще не пораженные гепатоциты; другие же убеждены, что толку от их приема нет и следует проводить интенсивную противовирусную терапию.

    Таким образом, гепатит С относится к категории заболеваний, выявление которых составляет некоторые трудности. Совершенствование методов диагностики, а также своевременные профилактические осмотры позволят снизить частоту развития данного заболевания. Немаловажной является и профилактика данной болезни. Следует тщательно избегать контактов с кровью, отказаться от приема наркотиков, только тогда это заболевание будет искоренено. Главное в профилактике и лечении — сознательное отношение пациента к своему здоровью.

    Для постановки диагноза «хронический вирусный гепатит С (ХВГС)» требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.

    Что показывает этот анализ и зачем он нужен?

    Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.

    Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.

    Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.

    Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.

    Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.

    ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:

    • высокая чувствительность – 97-98%;
    • гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
    • быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).

    Три вида ПЦР анализов

    Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.

    Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.

    Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.

    Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:

    • в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
    • часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
    • вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.

    Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.

    Как сдавать анализ ПЦР на гепатит С?

    Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:

    • исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
    • разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
    • накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
    • за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
    • до момента забора крови не рекомендуется курить.

    Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.

    Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).

    Результат анализа ПЦР на гепатит С

    Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.

    Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.

    Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.

    Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.

    Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.

    Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.

    Оставьте комментарий 8,418

    Качественный анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР на гепатит С определяет наличие или отсутствие ВГС в организме. В лабораторных условиях исследуется структура РНК, в составе которой и будет находиться вирус. В случае выявления вируса С необходимо пройти курс лечения, так как запущенное состояние печени в результате приведет к тяжелым последствиям. Качественный ПЦР проводится и после выздоровления для подтверждения отсутствия антител. Назначается и для профилактического осмотра. При низкой концентрации возбудителя в крови ПЦР (качественный) может ничего не обнаружить, ведь у диагностической системы есть свои пороги чувствительности. В случае начальной стадии болезни или легкой форме проводят ПЦР ультра диагностику на сверхчувствительном оборудовании.

    Что такое РНК вирус?

    Термином РНК вируса гепатита С (или вирус гепатита С РНК) называется само заболевание печени. Вирус С связывается со здоровой клеткой организма, проникая внутрь. Со временем разносится по всему организму, стоит только ему попасть в кровь. В итоге возбудитель проникает в печень, сращивается с ее клетками и усиленно работает. Печеночные клетки (гепатоциты) работают под его воздействием, претерпевая изменения, и от этого гибнут. Чем дольше вирус С находится в печени, тем большее количество клеток гибнет. Со временем развиваются опасные болезни, приводящие к злокачественному перерождению и летальному исходу.

    Заражение печени этой разновидностью вируса может никак не проявляться внешне. Долгие годы или десятки лет зараженный человек чувствует себя абсолютно здоровым, и только случайное обследование чаще всего и выявляет патологию. При сдаче крови на гепатит исследуется часть цепочки РНК (рибонуклеиновой кислоты), входящей в состав человеческого гена (ДНК). Результаты лабораторного исследования не стоит использовать для самолечения, ведь это только показатель. Точную картину и дальнейшую диагностику лучше определит врач.

    Когда делается: показания к исследованию

    В подтверждение ВГС назначается анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция). Исследования ПЦР помогают найти материал возбудителя в структуре РНК и назначить эффективную терапию. Назначается в следующих случаях:

    • выявление признаков воспаления печени;
    • скрининговые исследования с целью профилактики;
    • обследование контактирующих людей;
    • диагностирование гепатитов смешанного происхождения (определение главного возбудителя);
    • определение уровня активности размножения вируса при хронической форме;
    • цирроз печени;
    • для определения эффективности назначенного лечения.

    Исследования ПЦР назначает врач для определения эффективности курса лечения гепатита.

    Существует качественный, а также количественный анализ ПЦР. Количественный ПЦР показывает процентное соотношение РНК с носителями вируса в крови, а качественный указывает на вирусное присутствие либо отсутствие. Положительный показатель качества (присутствия РНК гепатита С) нуждается и в количественном исследовании. Высокий уровень концентрации возбудителя гепатита С сопряжена с риском его передачи, то есть заражения окружающих. Низкие показатели количества лучше поддаются лечению. Количество РНК-вирусов в составе крови никак не связано с интенсивностью заболевания. Делается анализ ПЦР и в случае интерфероновой терапии, чтобы назначить продолжительность и сложность лечебного курса.

    Особенности качественного ПЦР анализ на гепатит С

    Назначается качественный анализ с показателем полимеразной цепной реакции всем пациентам, у кого в крови обнаружены антитела к гепатиту С. Кто переболел и выздоровел, должен повторно пройти тестирование. Рекомендуется сдать анализ и на гепатит В, затем, в случае положительного заключения, и на гепатит D. Также качественно анализированная реакация должна проводиться в комплексе с другими анализами крови. Анализы покажут полную картину вирусного распространения.

    Из результатов теста будет виден только положительный анализ на гепатит С или же отрицательный, то есть наличие или отсутствия вируса. Если в выводе стоит «обнаружено», значит, вирус есть и продолжает активно действовать. Обозначение «не обнаружено» говорит об отсутствии вируса или его маленьком количестве. При таком показателе следует учитывать то, что аналитическая чувствительность диагностических систем разная и РНК гепатит С все же может находиться в крови, но не проявиться в анализе.

    Особо чувствительный метод ПЦР ультра гепатит С выявляет даже в мизерных количествах. Используется гибридизационно-флуоресцентное исследование, которое во много раз выше, чем стандартные системы ПЦР. Метод применяют в нескольких случаях:

    • подозреваются скрытые формы гепатита С;
    • диагностика ПЦР не подтвердила возбудитель, но антитела есть;
    • в случае выздоровления;
    • для выявления ранней стадии заражения.

    Вернуться к оглавлению

    Расшифровка анализа

    На окончательное решение при постановке диагноза влияет ПЦР расшифровка ВГС, в частности, при ультраметоде. Основной недостаток такого исследования — строгое соблюдение стерильных условий для образца и материалов. Небольшое отклонение иногда показывает неточные выводы аналитики, усложнит постановку диагноза и последующее лечение. Анализ ПЦР на определение РНК вируса гепатита не всегда уверенно показывает картину заболевания, иногда допускаются неточности, причем в обе стороны.

    Диагностируя вирус гепатита, рекомендуется применять комплексное обследование.

    Норма показателей

    Отсутствие в результатах исследования антител JgM к РНК вирусному гепатиту С считается нормой при анализе полимеразной цепной реакции. В то же время выводы серологического анализа указывают на присутствие антител к вирусу С и это также в пределах нормы. Качественное определение не показывает интенсивность заболевания, оно только выявляет возбудитель гепатита С в РНК. Такой анализ повторяют и после лечения, чтобы подтвердить действительное выздоровление.

    Отклонения

    Если антитела JgM к РНК ВГС присутствуют, это говорит о развивающемся заражении. Заболевание при этом протекает остро или хронически, проявляется в разных стадиях. Если зафиксировано уменьшение количества антител, то анализ будет свидетельствовать о достижении результатов лечения в ходе выздоровления. Встречаются в диагностике исключительно редкие случаи ложноположительных выводов. Они обнаруживаются у женщин при беременности и у людей с другими инфекционными болезнями.



    Источник: PecheniPochki.ru


    Добавить комментарий