Дезинфицирующие средства против гепатита

Дезинфицирующие средства против гепатита

Efficacy of five commercial disinfectants and one anionic surfactant against equine herpesvirus type 1
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4667681/

Мы исследовали влияние различных условий реакции на лошадь
герпесвируса типа 1 (EHV-1) на 5 коммерческих дезинфицирующих средств (3 четвертичных
соединения аммония [QAC] и 2 дезинфицирующие средства на основе хлора) и 1 анионное поверхностно-активное вещество.
QAC при их наивысшей рекомендуемой концентрации не имели вирулицидного эффекта на EHV-1 с
10 мин при 0 ° С или 1-минутном времени реакции при комнатной температуре. Хлорсодержащие
дезинфицирующие средства обеспечивали дезинфекцию EHV-1 с 10-минутным временем реакции при -10 ° C или 30 секунд
время реакции при комнатной температуре. В присутствии 5% фетальной бычьей сыворотки, QAC (кроме
для хлорида бензалкония) показали более стабильные вирулицидные эффекты, чем хлорсодержащие
дезинфицирующие средства. Вируцидный эффект анионного поверхностно-активного вещества был почти эквивалентен
то из QAC.

Equine herpesvirus type 1 (EHV-1), член семейства Herpesviridae, подсемейство
Alphaherpesvirinae и род Varicellovirus, является основным возбудителем
респираторных заболеваний у лошадей, а также может вызывать аборты и неврологические заболевания,
имеющих серьезные экономические последствия для конной промышленности [2]. При вспышке инфекции EHV-1 должны быть реализованы строгие меры контроля,
потому что вирус легко распространяется среди лошадей через вирусосодержащие выделения [1, 9]. Отброшенные плоды
и их плаценты и амниотическая жидкость содержат особенно большие количества вируса, поэтому любые
область, в которой произошел аборт, должна быть тщательно очищена и обработана
соответствующее дезинфицирующее средство [1, 9]. Сообщалось, что EHV-1 легко инактивируется обычными
дезинфицирующие средства [2, 9]; тем не менее, вспышки EHV-1, связанные с несколькими абортами, продолжают
во всем мире [3, 4,
10, 11],
возможно, предполагая, что эффективная дезинфекция не всегда достигается. В поле,
на эффективность дезинфицирующего средства влияют несколько факторов, включая температуру окружающей среды или
загрязнение органическими материалами [6]. Однако
эффекты дезинфицирующих средств против EHV-1 в различных условиях остаются полностью выясненными.
Здесь мы исследовали влияние температуры реакции, времени реакции и загрязнения
органическими материалами по дезинфекции EHV-1 5 коммерческими дезинфицирующими средствами и 1 анионным
поверхностно-активное вещество.

Мы использовали штамм EHV-1 06-I-70, который мы изолировали от легкого прерванного плода в
2005. Рабочее вещество вируса последовательно пассировалось дважды на клетках почек эмбриона лошади
выращенных в минимальной необходимой среде Eagle (EMEM), к которой добавляют бикарбонатный буфер и антибиотики
был добавлен. EMEM дополняли 10% фетальной бычьей сывороткой (FBS).

Пять коммерческих дезинфицирующих средств (Таблица 1Таблица 1. Дезинфицирующие средства, используемые в исследовании. Название продукта (форма) Распределитель Тип биотопливаАктивный ингредиент (аббревиатура) Рекомендуемые концентрации (% (мас. / Об.)) А) Ветасепт (жидкий) Zenoaq, Koriyama, JapanQuaternary ammonium10% (вес / объем) бензалконийхлорид (BZK) 0,02-0,05 Пакома L (жидкость) Meiji Seika Pharma, Tokyo, JapanQuaternary ammonium 10% (мас. / об.) моно; бис (триметиламмонийметилен
хлорид) -алкил (C9-15) толуол (MBAT) 0,005-0,02Cleakil-100 (жидкий) Tamura Seiyaku Corp, Tokyo, JapanQuaternary ammonium 10% (мас. / об.) дидецилдиметиламмонийхлорид (DDA) 0,005-0,02Crente (порошок) Meiji Seika Фарма, Токио, Япония. Хлор-основанный дихлоризоцианурат натрия (DCI) 0,02-0,2b) Antec Virkon S (порошок) Байер, Осака, Япония. На основе хлоридов пероксимоносульфат калия и хлорид натрия
(PMSC) 0.1b, c) a) Концентрации, рекомендованные производителями для дезинфекции животноводческих амбаров.
б) Концентрации, выраженные как эффективный хлор. c) Концентрация, рекомендованная
производитель для использования в дезинфицирующих ногах.

Чтобы имитировать полевую ситуацию, суспензию вируса смешивали 1: 3 с амниотической жидкостью (AF)
собранных асептически от беременной кобылы и не содержащих обнаруживаемых нейтрализующих
антитела против EHV-1. Титр EHV-1, смешанный с AF (EHV-1 / AF), составлял 5 ×
108 единиц формирования бляшек / мл. Двадцать микролитров EHV-1 / AF были
добавляли к 180 мкл каждого химиката без смешивания. Стерильная дистиллированная вода была
используемый в качестве контроля, за исключением испытания, проведенного при -10 ° С, и в этом случае использовали 20% метанола
вместо. Сразу после реакции при -10 ° C (в морозильной камере), 0 ° C (на льду) или в комнате
(23-25 ​​° С) в течение 10 мин, реакционные смеси разводили до 1 в 10 с помощью FBS.
Прекращение инактивации вируса 10-кратным разбавлением реакционных смесей с FBS
было подтверждено в нашем предварительном исследовании (данные не показаны). Титра вируса в реакции
смеси определяли с помощью анализа бляшек в клетках РК-13. Последовательные 10-кратные разведения вируса
суспензию готовили в FBS; концентрация FBS в каждом разбавлении поддерживалась постоянной,
потому что предварительное исследование показало, что FBS может способствовать образованию бляшек EHV-1.
Пятьдесят микролитров каждого разведения затем инокулировали в монослои клеток RK-13 ​​в
24-луночные планшеты (4 лунки на разведение) и инкубировали при 37 ° С в 5% -ном СО2-инкубаторе
в течение 1 часа. Оверлейная среда (0,5 мл EMEM, содержащей 5% FBS и 1%
метилцеллюлозу) добавляли в каждую лунку и планшеты инкубировали при 37 ° С в 5%
CO2-инкубатор в течение 5 дней. Затем клетки фиксировали и окрашивали кристаллическим фиолетовым
раствор (0,2% кристаллический фиолетовый, 10% метанол, 10% формалин и 2% ацетата натрия) для облегчения
наметки. Минимальная эффективная концентрация (MEC) была определена как самая низкая
концентрация каждого химического вещества, уменьшающая титр вируса на 99,99% или выше по сравнению с
что в контрольных реакциях. Количество оставшегося живого вируса было одинаковым в обоих
(стерильная дистиллированная вода и 20% метанол) приблизительно при 60%
добавленный вирус. Был также изучен вирулицидный эффект каждого химического вещества при комнатной температуре
с временем реакции 30 с, 1 мин или 5 мин. Оценить влияние загрязнения на
органических веществ, каждое химическое вещество, содержащее 5% FBS, испытывали на вирулицидный эффект с помощью
10 мин при комнатной температуре.

Значения MEC каждого химического вещества в разных условиях приведены в таблице 2Таблица 2. Значения MEC (%) каждого химического вещества против EHV-1 при разных условиях Название продукта Сокращение активного ингредиента Время реакции Температура реакции RTa) 0˚C-10˚CVetaseptBZK10 min0.0125 / 0.05 b)> 0,05NDc) 5 мин 0,025-d) -1 мин> 0,05 — 30 секND — Пакома LMBAT10 мин 0,02 0,02> 0,02ND5 мин 0,02-1,1 мин> 0,02 — 30 сND — Cleakil -100DDA10 мин0,01 / 0,01> 0,02ND5 мин 0,02 — 1 мин> 0,02 — 30 сND — CrenteDCIe) 10 мин0,025 / 0,10.10,25 мин 0,05-1,5 мин 0,1 — 30 сек0,1 -Antec Virkon SPMSCe) 10 мин0,00625 / 0,01250,025055 мин0,0125—1 мин 0,05 — 30 с 0,05 — линейный алкилбензолсульфонат натрия LAS10 мин0,0125 / 0,0250,05> 0,055 мин 0,025-1 мин> 0,05 — 30 сND — а) Комнатная температура (от 23 до 25 ° C). b) Значения MEC при отсутствии / наличии 5% FBS. с)
Не выполнено. d) Эти условия реакции не использовались в нашем исследовании. e) Значения MEC DCI
и PMSC выражены как эффективный хлор.

Время реакции зависит от вирулицидного эффекта каждого химического вещества. Все значения MEC
для 5-минутной реакции при комнатной температуре, за исключением MBAT, были удвоены
по сравнению с таковыми для 10-минутной реакции. Кроме того, QAC и LAS не имели вирулицидных
эффект на EHV-1 / AF при времени реакции менее 1 мин. Напротив, DCI и PMSC
дезинфицированный EHV-1 / AF с временем реакции 30 секунд при концентрациях 0,1% и 0,05%
соответственно.

Все испытуемые химикаты были способны дезинфицировать смесь EHV-1 и органического материала
(AF). Однако дальнейшее добавление 5% FBS в химические растворы уменьшало вирулицидное
влияние дезинфицирующих средств на основе хлора и ЛАГ. Особенно, в присутствии 5% FBS, DCI
потребовала 400% большей концентрации для дезинфекции EHV-1 / AF по сравнению с тем, который необходим в
отсутствие 5% FBS. Значения MEC PMSC и LAS удваивались с добавлением 5% FBS. В
контраста, на вирулицидные эффекты QAC не влияло добавление 5% FBS,
за исключением случая BZK, значение MEC которого увеличилось на 400% с добавлением 5%
FBS. Эти результаты согласуются с общим пониманием и с предыдущими выводами, что
вируцидные эффекты ККК в присутствии органических материалов более стабильны, чем те, которые
дезинфицирующих средств на основе хлора [6, 12, 13].

Как правило, механизмы действия дезинфицирующих средств против вирусов не были полностью
выяснено [7]. Однако возможно, что QAC
разрушают вирусную липидную оболочку действием их поверхностно-активного вещества и что на основе хлора
дезинфицирующие средства денатурируют вирусные белки под действием свободного хлора. Мы предположили, что
снижение эффективности QAC против EHV-1 при низкой температуре реакции было связано с плохими
подвижность молекулы поверхностно-активного вещества в холодном растворителе. Кроме того, уменьшение суммы
свободного хлора, вызванного реакцией с FBS, возможно, снизили вируцидную эффективность
дезинфицирующие средства на основе хлора.

LAS является пенообразователем в кухонных детергентах и ​​обычно не используется в качестве дезинфицирующего средства. это
Вируцидный эффект на EHV-1, однако, был почти эквивалентен доказательству тестируемых QAC.
Таким образом, рутинная очистка таких предметов, как клей, ведра, оборудование для уборки и одежда
с разбавленным кухонным моющим средством, содержащим не менее 0,05% LAS, может быть эффективным в предотвращении
«Бесшумная» передача EHV-1 через вирус, лишающийся от бессимптомных лошадей [2, 9].

Здесь мы оценили вирулицидные эффекты 6 химических веществ на EHV-1 в разных условиях.
Дезинфицирующие средства на основе хлора были способны дезинфицировать EHV-1 при -10 ° C. Хидакский район
Хоккайдо, на севере Японии, является одним из самых холодных мест, где лошадиные фермы
найденный. Наше полевое обследование зимой в районе Хидака показало, что, хотя
температура наружного воздуха снизилась до -20 ° C (самая низкая в течение периода съемки), температура
в стабильном состоянии оставались при или выше -10 ° C (данные не показаны). Поэтому должно быть возможно
использовать дезинфицирующие средства на основе хлора, разбавленные антифризом в дезинфицирующих ваннах для ног
холодный климат. Жидкость для омывания ветрового стекла холодной погоды, содержащая метанол в качестве антифриза
является потенциальным потенциальным разбавителем. Однако влияние других типов антифриза
на вирулицидные эффекты дезинфицирующих средств необходимо исследовать до этого антифриза
агенты могут использоваться в качестве разбавителей. Кроме того, поскольку вирулицидные эффекты
дезинфицирующие средства на основе хлора были уменьшены за счет присутствия органического материала,
раствор дезинфицирующего средства необходимо часто заменять. QAC, которые относительно менее токсичны
а также без запаха и бесцветного [6], могут быть использованы как
дезинфицирующие средства в различных ситуациях. Однако их следует разбавить теплой водой и сохранить
в контакте с объектами в течение относительно длительного времени, поскольку низкие температуры реакции и
короткое время реакции критически уменьшало их вирулицидную эффективность. Использование кухонного моющего средства
содержащий LAS для обычной очистки, может снизить риск распространения EHV-1. Информация
представленные здесь, должны быть полезны для применения химических веществ, проверенных в полевых ситуациях.

Мы признательны г-же Кажу Аракаве, г-ну Акире Кокубун и г-же Акико
Suganuma за их неоценимую техническую помощь.



Источник: rupubmed.com


Добавить комментарий