Пцр или ифа на гепатит

Пцр или ифа на гепатит

Переезд склада в Европу.
Реализуем препараты от гепатита С в России по закупочной цене - ликвидация склада
Перейти на сайт

ИФА в диагностике вирусных гепатитов. Возможности иммуноферментного анализа

Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов основывается на применении иммунохимических и молекулярно-биологических методов исследований. Основными иммунохимическими методами являются радиоизотопный или радиоиммунный (РИА) и иммуноферментный (ИФА). В основе иммунохимических методов диагностики лежит специфическое взаимодействие антиген — антитело с последующим выявлением комплекса при помощи специальных меток. Наиболее распространенным является иммуноферментный анализ.

Первые сообщения о применении иммуноферментного анализа. как метода для определения каких-либо веществ были опубликованы в 1971 году одновременно двумя исследовательскими группами — В. Van Weemen, A. Schuurs и Е. Engvall, P. Perlmann. В основе иммуноферментного анализа лежит следующий принцип: на твердой фазе, в качестве которой используется, главным образом, поверхность лунок полистиролового планшета, фиксируется антиген возбудителя инфекции или антитела (часто смесь антител) к антигенам, которые необходимо обнаружить. Этот антиген или антитела, которые зафиксированы на твердой фазе, называются иммуносорбентом.

В результате инкубации иммуносорбента и испытуемой сыворотки при наличии определяемого агента происходит их связывание в комплекс антиген — антитело. После процедуры промывки, в ходе которой удаляются несвязанные антигены и антитела, проводится инкубация с конъюгатом. В качестве конъюгата при детекции HBsAg используют анти-HBs, при детекции антител к вирусу гепатита С —антитела к иммуноглобулинам человека (антивидовой конъюгат), меченные пероксидазой хрена. В итоге этой инкубации происходит присоединение к уже имеющимся комплексам антиген — антитело дополнительно внесенного конъюгата. После удаления несвязавшегося конъюгата (отмывки) в лунки вносится субстрат. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата используют перекись водорода в сочетании с индикатором, в качестве которого наиболее часто применяют ортофенилендиамин (ОФД) или тетраметилбензидин (ТМБ). Результат оценивается фотометрически.

Качество и надежность аналитических возможностей иммуноферментного метода характеризуются рядом критериев, к числу которых относятся чувствительность, специфичность, правильность и воспроизводимость.

Чувствительность — то минимальное количество вещества, которое может быть обнаружено при помощи иммуноферментного анализа. При этом нижним пределом чувствительности данного метода является концентрация исследуемого вещества в образце, которая соответствует наименьшему положительному результату определения, статистически достоверно отличающемуся от показателей заведомо отрицательных образцов. Чувствительность ИФТС зависит от ряда обстоятельств, связанных как с конструкцией тест-системы (аффинность иммуносорбента, качества экстракционных и буферных систем), так и разрешающей способностью и точностью метода регистрации.

Специфичность — способность выявлять именно те компоненты, для определения которых предназначена данная иммуноферментная тест-система. Специфичность ИФА определяется во многом перекрестной реакцией антител или антигенов (то есть композиции, используемой в качестве иммуносорбента), с близкородственными соединениями, а также составом инкубационной среды (матрикс-эффект).

Правильность — соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же контрольного образца с истинной величиной измеряемого параметра. Правильность определения в ИФА зависит от качества самой тест-системы и контрольного образца. Для хороших иммуноферментных тест-систем показатели правильности лежат в пределах 90-110 %. Особенностью медико-биологических исследований в ИФА является невозможность установления точной величины, и поэтому за истинную величину принимается средняя от нескольких экспертных лабораторий. Статистическим критерием правильности служит средняя арифметическая и степень ее отклонения от истинного значения, выраженная в процентах.

Воспроизводимость — способность тест-системы показывать одни и те же значения при повторных исследованиях одного и того же образца. Воспроизводимость зависит как от случайных погрешностей (ошибок) при проведении процедуры постановки реакции, так и от качества тест-систем и точности метода регистрации результатов. Считается, что воспроизводимость одних и тех же контрольных образцов одной фирмы в разных лабораториях не должна превышать величину коэффициента вариации в 15%.

Существует несколько специфических схем ИФА для определения маркеров вирусных гепатитов: а) прямой иммуноферментный анализ; б) непрямой иммуноферментный анализ; в) конкурентное ингибирование; в) «ловушеч-ный», или «capture» метод.

Из молекулярно-биологических методов диагностики вирусных гепатитов чаще используются полимеразная цепная реакция и гибридизация. Эти методы, особенно ПЦР, позволяют выявлять очень малые количества специфической вирусной ДНК или РНК и, таким образом, судить о репликации, а в ряде случаев и об активности репликации.

Главная — Анализ ИФА на вирус гепатита – тесты в лаборатории НИАРМЕДИК

Анализ ИФА на гепатит

Иммуноферментный анализ играет одну из ключевых ролей в диагностике вируса гепатита в человеческом организме. Как известно, иммунная система реагирует на внедрение микроорганизма выработкой антител – специальных кровяных белков. Таким образом, анализ ИФА всецело построен на реакции антитело-антиген. В результате проведения данного исследования в сыворотке крови выявляются либо антигены микроба, либо антитела.

Пройти анализ ИФА на гепатит можно в лаборатории НИАРМЕДИК.

Для чего нужен анализ ИФА

Проведение иммуноферментного анализа на гепатит используется для определения антител в крови. Анализ ИФА показывает:

  • есть ли у пациента антител к вирусу гепатита;
  • тип вируса, который присутствует в организме у человека.

Пациенту назначается анализ ИФА на вирус гепатита, в случае положительного результата проводится исследование методом ПЦР. Иммуноферментный анализ ищет специфические маркеры вируса гепатита, оценивает их количество. Также тесты ИФА могут проводиться для определения эффективности назначенного лечения или вакцинации.

Как подготовиться к ИФА на гепатит

Материалом для исследования, целью которого является определение маркеров гепатита, служит сыворотка крови, взятая у пациента. Если задачей исследования является проверка эффективности противовирусной терапии, сдача крови рекомендуется еще до первого приема лекарственных препаратов. Если пациент на протяжении длительного времени применяет другие медикаменты, ему обязательно следует уведомить об этом лечащего врача еще до теста. Также перед анализом ИФА на гепатит A, B, C рекомендуется отказаться:

  • от приема острой, жирной, соленой пищи;
  • от курения (это можно сделать за пару часов до анализа);
  • от физических нагрузок.

Срок готовности результатов анализа ИФА на гепатит в среднем занимает одни сутки.

Антитела класса IgM по отношению к вирусу гепатита A диагностируются в начале возникновения клинических симптомов данной болезни, в течение месяца их концентрация набирает обороты, затем в течение года снижается до значения нормы.

Показания для ИФА на гепатит A:

  • холестаз (задержка выхода желчи);
  • клинические симптомы вирусного гепатита;
  • увеличение показателей АСТ, АЛТ;
  • взаимодействие с человеком, у которого вирусный гепатит данной группы;
  • нахождение в очаге инфекции (к примеру, детский сад, школа).

Оценка результатов анализов на гепатит A

  • Отрицательный результат говорит об отсутствии данного гепатита;
  • Положительный результат свидетельствует об активной форме вируса гепатита A или о том, что он был перенесен недавно.

Анализ ИФА на гепатит B

Анализ на гепатит B проводится в целях диагностики у пациента антител к данному заболеванию (Anti-HBs). Антитела считаются показателем наличия иммунитета, их обнаружение в крови позволяет определить хроническое или острое инфицирование данным вирусом, дать оценку результативности терапии острого гепатита B, вакцинации против него.

Показания для ИФА на анти-HBsAg:

  • подтверждение эффективности вакцинации, терапии;
  • подготовка к вакцинации;
  • симптомы вирусного гепатита, при этом маркеры прочих вирусных гепатитов должны отсутствовать.

Оценка результатов анализов на анти-HBsAg

  • Отрицательный результат говорит об отсутствии у пациента иммунитета к данному вирусу.
  • Положительный результат свидетельствует о наличии хронической или острой формы данного заболевания, о перенесенном гепатите В, после вакцинации.

Анализ ИФА на гепатит C

Проведение анализа ИФА на гепатит C необходимо для диагностики недавнего (срок с 4-5 недели после инфицирования) или острого инфицирования данным вирусом.

Показания к ИФА на гепатит C:

  • уровень АЛТ, АСТ превышает норму;
  • пациент готовится к хирургической операции;
  • планирование беременности;
  • клинические симптомы вирусного гепатита;
  • внутривенная наркомания;
  • незащищенный сексуальный контакт;
  • холестаз.

Оценка результатов ИФА на гепатит C

  • Отрицательный результат говорит об отсутствии данного вируса или его нахождении на стадии инкубации;
  • Положительный результат свидетельствует о периоде выздоровления или наличии заболевания, о наличии антител в организме, требуется дальнейшие исследования для определения активности процесса.

Ложноположительный результат ИФА

Ложноположительный результат ИФА на гепатит наиболее часто встречается при следующих условиях:

  • хронические болезни кровеносной системы;
  • грипп, ОРВИ в острой форме;
  • другие инфекции;
  • нарушение метаболизма;
  • аутоиммунные или гормональные патологии;
  • беременность;
  • наличие злокачественных опухолей.

В подобных случаях проводится повторное исследование.

Где сдать анализ ИФА на гепатит

Сдать анализ ИФА на гепатит взрослым, детям, беременным женщинам в удобное время без очереди вы можете в ближайшей к вам клинике НИАРМЕДИК. Стоимость перечисленных исследований можно узнать на нашем сайте в прейскуранте услуг. Дополнительную информацию по подготовке к забору материала на исследования вы можете узнать на нашем сайте в разделе Подготовка к анализам , а также у операторов контакт-центра по телефону +7 (495) 6-171-171.

2008- Все права защищены Ниармедик
Телефон для справок: +7 (495) 6-171-171

О возможных противопоказаниях необходимо проконсультироваться с врачами Клиники Ниармедик по телефону +7 (495) 6-171-171. Вся информация, размещенная на сайте компании, носит справочно-ознакомительный характер и не является публичной офертой в соответствии со ст. 437 ГК РФ

Источники: http://meduniver.com/Medical/zabolevania_pecheni/ifa_v_diagnostike_gepatita.html, http://www.nrlab.ru/analiz-ifa-gepatit/

Комментариев пока нет!



Источник: hepc.nextpharma.ru


Добавить комментарий